Бруцела Антитіло Еліза Набір

Специфікація

 

Процедури та тестування

 

Крок 1 Процедура тестування

1.1 Підготовка розчину для прання

Wконцентрація wАсінська рідина:Перед використанням розчину для прання слід відновити до кімнатної температури (20-25 градус) і рівномірно похитнутись, щоб зробити його рівномірним. Потім розбавте в 20 разів концентроване розчин промивання очищеною водою (наприклад, 5мл концентрованого промивання розчину додавання до 95 мл очищеної води), добре перемішайте, а розведена рідина промивання може зберігатися при 2-8 градусі протягом 7 днів.

1.2 Підготовка зразків

Кровна кров тварини взяли, центрифугували при 4000 об / хв протягом 10 хвилин, і супернатант збирали. Сироватка також може бути згортається природним шляхом без гемолізу.

② Коли розмір вибірки великий, щоб забезпечити послідовний час експериментальної реакції. Змішайте зразок сироватки з робочим розчином антитіла при 1: 1 у пластині розведення (70UL зразок сироватки + 70 ul робочий розчин антитіла). Негативний контроль та позитивний контроль такі ж, як і зразок сироватки.

1.3 Процедура тестування

① Візьміть мікропланшет з міткою ферментів (згідно з кількістю зразків, можна розібрати та використовувати кілька разів), встановити по два свердловини для негативних та позитивних контрольних груп, додайте 100Ul передової суміші до мікропланшетної мітки ферменту. Акуратно струсіть зразок у колодязі, використовуючи пластину пластини для покриття пластини, і інкубуйте на 37 градусів протягом 30 хвилин.

② Відкрийте плівку для ущільнення пластини, розсипте розчин у пластині добре, додайте до кожної лунки 300 мкл робочої концентрації рідини, а потім відкиньте рідину в лунку. Повторіть вищезазначені кроки 5 разів і, нарешті, обсушіть на чистому абсорбентному папері.

③DІлютований фермент кон'югат:Розбавити кон'югат ферменту (50 ×) 50 разів (наприклад: 20UL ферментний концентрація ферменту + 980 ul розріджувач 1, необхідна конкретна кількість обчислюється відповідно до кількості випробувальних зразків), добре змішуйте і відкладається.

④add 100 мкл кон'югату ферменту до кожної лунки, накрийте тарілку та інкубуйте на 37 градусів протягом 30 хвилин.

⑤ Промивання ферментів, специфічна операція така ж, як і наведена вище ②.

⑥add 100 мкл розчину підкладки до кожної лунки, покрийте тарілку і інкубуйте на 10 хвилин при 37 градусах від світла.

⑦add 50 мкл зупиняє розчин до кожної лунки і визначте результат протягом 5 хвилин.

 

Крок 2 Інтерпретація результатів

 

Значення OD450 кожної свердловини було прочитано на 96- зчитувачу мікропланшетів.

2.1 Валідація

 

Середнє значення AD45 0 нм позитивного контролю було <0,35, а середнє значення OD450 нм негативного контролю/позитивного контролю було більшим або рівним 3,5, експериментальні результати були дійсними. В іншому випадку тест слід повторити.

2.2 Метод розрахунку

Для кожного зразка обчисліть PI (Blockingr ATE) наступним чином за допомогою виправленого зразка та контрольних значень:

2.3 Інтерпретація результатів

Коли Pi <20%, його вважають негативним.

Коли pi> 30%, його вважають позитивним.

Коли на 20% менше або дорівнює ПІ менше або дорівнює 30%, його вважають підозрілим, і пропонують повторювати вибірку та перевірити через тиждень.

Популярні Мітки: Brucella Antibody Elisa Kit, China Brucella Antibody Antibo Elisa Kit постачальники, виробники, фабрика